出处:生命科学卷 • 总论 • 遗传学
词条 | 消减杂交 |
释义 | 消减杂交 消减杂交 筛查不同类型的细胞或同一类型但处于不同生理状态下细胞所特有的DNA序列的技术。以筛查杜兴肌营养不良症(DMD)为例,DMD患者的基因组DNA用超声处理扯断生成带有随机断裂末端的DNA片段,称为驱动DNA。再将个体基因组DNA用限制性内切酶切成带有黏性末端的DNA片段,称为目标DNA。将这两种DNA片段混合后变性并杂交,生成三种双链DNA分子:两端都是随机断裂末端;带随机断裂末端和黏性末端的双链分子;两端都是酶切黏性末端。由于驱动DNA与目标DNA是按200∶1混合的,所以凡是与驱动DNA序列相同的目标DNA应该都有机会生成第二种双链分子。剩下的目标DNA自身复性成第三种双链分子。这就是目标DNA中所特有的DNA片段,是驱动DNA所没有的,也就是DMD患者基因组中未发生微小缺失的正常基因。这种DNA双链分子两端都是酶切的黏性末端,可以克隆在载体中。有了正常基因的DNA就可作为探针,进一步分离获得DMD患者的有缺失的基因。 出处:生命科学卷 • 总论 • 遗传学 |
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