菌种保藏方法之一。把所要保藏的微生物细胞悬浮在保护剂（如脱脂牛奶、马血清或10%蔗糖加1%谷氨酸等）中，装入安瓿内，于－35～－40℃迅速冷冻（常用干冰和酒精的混合物作冷冻剂）一小时——预冷，再在－20℃左右温度下抽气，至真空度为13.332 2～6.666 1帕（0.1～0.05毫米汞柱），并保持该真空度至样品干燥，然后密封。这样的菌种可在室温或低温中保藏几年至十几年。