比色法和分光光度法的定量基础。一束单色光通过一吸收溶液时，透过光的强度会减弱，当溶液浓度愈大或液层厚度愈大时，光强度的减弱均愈显著。其关系式为：A=lg(I₀/I）=εbc。式中：A为吸光度，表示溶液对光的吸收程度；透射光强度I与入射光强度I₀之比称为透光度；ε为摩尔吸光系数，是物质浓度为1摩/升、液层厚度为1厘米时的吸光度，其大小与溶液的性质及单色光波长有关，是反映显色反应灵敏程度的重要参数；b为液层厚度；c为溶液组成的量度。