亦称“生物检定”。利用某些生物对某些物质（如维生素、氨基酸）的特殊需要，或对某些物质（如激素、抗生素、药物等）的特殊反应来定性、定量测定这些物质的方法。例如，用小白鼠的惊厥反应来测定胰岛素，用微生物来测定维生素B₁₂等。生物测定有时比其他测定法灵敏和专一。